Desthiobiotin-PEG6-NHS ester,去硫鳥嘌呤-PEG6-NHS酯的特點
2026-08-21
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基本屬性
定義:三官能團可逆生物素化標記試劑,由脫硫生物素親和標簽、六單元親水PEG間隔臂、NHS琥珀酰亞胺活化酯三部分構成,具有可逆親和結合與高效伯胺定點偶聯(lián)核心特性
英文名稱:Desthiobiotin-PEG6-NHS ester,PEG6-Desthiobiotin-NHS,Desthiobiotin-hexa(ethyleneglycol)-NHS ester
別名:脫硫生物素-六聚乙二醇-琥珀酰亞胺酯,去硫鳥嘌呤-PEG6-NHS酯
分子式:C??H??N?O??
分子量:646.74
外觀:白色至淺黃色固體/淡黃色油狀粘稠液體
純度:≥95%
溶解性:溶于DMSO、DMF等無水有機溶劑,稀釋至水相緩沖液后無析出;在高鹽、高濃度去污劑的復雜緩沖體系中依然可保持全溶解狀態(tài)
儲存條件:-20℃干燥避光密封存儲,嚴禁反復凍融;NHS酯遇水極易水解失活,水溶液需現(xiàn)配現(xiàn)用
儲存時間:1年
使用限制:僅限科研,不可用于人體或臨床
結構式:

分子結構與核心特性
結構組成:
脫硫生物素(Desthiobiotin):無硫生物素類似物,缺少硫原子但保留與鏈霉親和素特異性可逆結合核心結構,解離常數(shù)高于天然生物素
PEG6鏈:由六個乙二醇單元組成,作為柔性親水間隔臂,大幅降低標記分子與固相載體間空間位阻,提升試劑水溶性,減少非特異性結合
NHS酯基團:胺特異性活性基團,在pH7.0–9.0弱堿性緩沖液中,可與多肽、蛋白、氨基修飾核酸表面的伯氨基自發(fā)形成穩(wěn)定酰胺鍵,反應副產(chǎn)物僅為琥珀酰亞胺小分子,易通過脫鹽柱去除
關鍵特性:
高特異性結合:脫硫生物素與鏈霉親和素的結合具有高選擇性和特異性,可確保標記的準確性
溫和洗脫特性:具有軟釋放特性,僅需2mM游離生物素競爭性孵育即可溫和洗脫結合分子,無需變性試劑,完整保留大分子空間結構與生物活性
化學活性可控:NHS酯的高效胺反應性使標記過程快速、可控,適用于復雜生物體系,反應通常在堿性緩沖液(pH7-9)中進行,無需催化劑
空間靈活性:PEG6鏈提供分子空間延展性,降低空間位阻,提高反應效率,在含0.1%吐溫-20的緩沖體系中標記效率較PEG4版本提升近30%
高穩(wěn)定性:在活細胞培養(yǎng)體系的pH7.4環(huán)境中可保持近1小時的活性,便于完成膜表面蛋白的特異性標記
低背景干擾:PEG6長間隔臂顯著減少標記分子與固相介質的疏水相互作用,背景雜帶降低40%以上,大幅提升純化產(chǎn)物純度
實驗操作關鍵控制要點
標記摩爾比:控制試劑與生物大分子的摩爾比為3–8:1,過量試劑需通過透析去除
洗脫緩沖液:游離生物素濃度2mM即可實現(xiàn)全解離
取用注意:取用前確保試劑干燥,避免頻繁的溶解和凍干;從冰箱取出后,置于干燥器中緩慢升至室溫,再打開瓶蓋取用;取用后應充入惰性氣體,用封口膜封口,擰緊瓶蓋裝入自封袋,并及時放回冰箱保存
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